western blot電泳的膠怎么放平
western blot電泳的膠怎么放平 | 時間: April-9 9:50:48 | 分類:技術欄目
凌儀生物提供高速離心機，美國Bio-rad伯樂電泳，德國eppendorf艾本德移液器，美國ABI基因擴增儀PCR，雅培原位雜交儀，Thermo熱電離心機等實驗室儀器設備，以及Corning康寧，Axygen愛思進，Greiner格瑞拉等耗材要省錢，別錯過哦。 近期實驗室western blot電泳的膠做出來不夠平整，仔細思考一下實驗步驟，總結有一下幾個方面原因供大家參考
1)實驗用的玻璃板必須洗干凈
2)過硫酸銨和TEMED的加量不合適，加量較多時，凝膠凝固過快也會膠不平，較多按照分子克隆加倍
3)加完試劑以后沒有很好的搖勻，導致有些部位的聚合劑濃度過高，聚合相對較快造成膠不平；
4)稍微注意手法，均勻加入
5)灌膠后應該用水或者正丁醇壓膠面或用20%的乙醇封頂(沒有毒性可以除氣泡，使用效果極好）。
6)邊緣膠是不容易聚合完全的，灌完膠后要立即加無水正丁醇覆蓋，濃度越低的膠越不要使用雙蒸水壓頂，另外還可以在壓頂試劑如正丁醇中添加少許AP來增加邊緣膠的凝聚強度
7)溫度也是影響膠聚合的重要因素，有些同事為了讓膠更快的凝固而把膠放到50度的溫箱，由于受熱不均勻，造成膠聚合不均勻。
