實驗中提取質粒DNA時的注意點
實驗中提取質粒DNA時的注意點 | 時間: May-15 16:07:06 | 分類:技術欄目
凌儀生物提供高速離心機，美國Bio-rad伯樂電泳，德國eppendorf艾本德移液器，美國ABI基因擴增儀PCR，雅培原位雜交儀，Thermo熱電離心機等實驗室儀器設備，以及Corning康寧，Axygen愛思進，Greiner格瑞拉等耗材要省錢，別錯過哦。 提取質粒的時候，較后一步的酒精揮發很關鍵，基本上是其后續的酶切反應的決定性因素。所以這一步盡量揮發長一點時間，較好是空調吹熱風，或是37度溫箱放長一點的時間，我試過室溫過夜，酶切很好。
將amp濃度提高到200ug/ml，下班前接種，次日一早收獲菌體，此時OD雖然不高，質粒豐度卻不一般。菌體量少些，操作體積（管數）也小（少）。
手提質粒，如果用氛氯仿和氯仿兩步抽提，再注意一下手法，嚴格按照參考書上面的操作的話，提出的質粒不比任何質粒提取試劑盒差，我感覺好像還好一點，我就用過一次試劑盒，比較了之后不如我手提的好，以后再也沒用過了。
