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配置PCR液時的注意方法

配置PCR液時的注意方法 | 時間: May-15 16:47:49 | 分類:技術(shù)欄目

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    在做克隆鑒定的時候經(jīng)常需要在酶切鑒定前進行PCR鑒定,每次配置PCR反應(yīng)液很繁瑣,可以將其配置類似kit的形式,按你需要的反應(yīng)體系列表,然后放大100倍配置100×主反應(yīng)液(100次反應(yīng)),其中含buffer,Mg2+,dNTPs,但不含引物和Taq酶,然后可以10×分裝或一管儲存在-20度,在需要的時候拿出融開,然后按所需的PCR反應(yīng)個數(shù)吸取相應(yīng)的倍數(shù),再補加相應(yīng)反應(yīng)倍數(shù)的Taq和引物,混勻后分裝,這樣做的好處如下:

  (1)可極大的節(jié)省寶貴的時間,可早點收工,看球;
  (2)避免每次反應(yīng)加樣不均的可能;
  (3)大大減少PCR假陽性的產(chǎn)生。

本文標題: 配置PCR液時的注意方法 | Tags:PCR 實驗PCR時注意的技巧

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